miR-19b对非肥胖糖尿病小鼠胰岛细胞的影响

文章信息

Effectof miR‑19b on the protective effect of Exendin‑4 on islet cells in non‑obese diabetic mice

JINSHUI HE,YUEYA KANG, CHAOWEI LIAN, JINZHI WU, HUOWANG ZHOU and XIAOLING YE

DOI: 10.3892/etm.2019.7598

发表杂志：Experimental and Therapeutic Medicine （IF=1）

1. 研究背景

糖尿病分为Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病。I型糖尿病由于胰岛素抵抗、胰岛素和遗传因素绝对不足，I型糖尿病患者多为非肥胖糖尿病（NOD）患者，据报道，GLP-1通过抑制miR-19b诱导的ATP结合盒转运体A1（ABCA1）的下调来调节胆固醇稳态，ABCA1在调节胆固醇向载脂蛋白A-I的流出中起重要作用，是维持细胞胆固醇稳态的主要机制。Exendin-4与GLP-1（12）具有高度的亲和力和同源性。因此推测miR-19b也影响Exendin-4的作用。

2. 方法

2.1所有小鼠适应性地喂食普通营养饲料一周，然后除对照组外干扰miR-19b表达（干扰组）。

2.2T细胞相关细胞因子的检测。严格按照试剂盒说明书用ELISA法检测小鼠外周血IL-2和IL-10水平。

2.3胰岛细胞凋亡的检测。胰腺组织切片，TUNEL染色，计算胰岛细胞凋亡率。

2.4PCR芯片（Wcgene Biotech,Shanghai, China）研究对照组和干预组小鼠外周血miR-19b的表达水平。

3. 结果

3.1干扰miR-19b的结果。

    对照组小鼠外周血miR-19b表达水平为1.653±0.329，明显高于干扰组的1.128±0.306，说明干扰成功（图1）

图1.对照组和干预组小鼠外周血miR-19b的表达水平。

3.2血糖（BGL）水平检测结果

     在Exendin-4干预前，4组BGL差异无统计学意义，而干预4周和8周后BGL差异有统计学意义。hoc后试验显示，干预4周和8周后，中、高剂量组小鼠BGL均低于对照组，而高剂量组BGL低于中剂量组。干预4周后，对照组与低剂量组BGL无显著性差异，而干预8周后，低剂量组BGL较低。

3.3 T淋巴细胞亚群检测结果

     干预8周后，4组小鼠胰腺组织和外周血CD4+、CD8+细胞水平差异有统计学意义。hoc后检测显示，对照组CD4+细胞水平低于中、高剂量组，但与低剂量组无明显差异，中剂量组CD4+细胞水平低于高剂量组；对照组CD8+细胞水平高于中、高剂量组，但低于低剂量组，中剂量组CD8+细胞水平高于高剂量组。

3.4  T细胞相关细胞因子检测结果。

     干预8周后，4组小鼠IL-2、IL-10水平差异均有显著性。hoc试验结果显示，干预8周后，中、高剂量组IL-2水平较对照组低，IL-10水平较高，而高剂量组IL-2水平较中剂量组低，IL-10水平较高。中、高剂量组IL-2水平较低，IL-10水平较高。干预8周后，对照组与低剂量组IL-2水平无显著性差异，而干预8周后，低剂量组IL-10水平高于对照组。

3.5胰岛细胞凋亡检测结果。

     Exendin-4干预8周后，胰岛细胞凋亡率对照组为19.33±1.04%，低剂量组为20.59±1.06%，中剂量组为16.45±1.07%，高剂量组为14.12±1.02%，差异有统计学意义四组。对照组细胞凋亡率显着高于中，高剂量组，但与低剂量组无差异。此外，中剂量组的细胞凋亡率高于高剂量组。

图2.胰岛细胞凋亡率检测结果。

结论

    我们的结果表明，减少miR-19b表达可改善Exendin-4的治疗效果。然后，当miR-19b表达被抑制时，分析不同浓度的Exendin-4的治疗效果。结果表明，Exendin-4的治疗效果随着浓度的升高而改善，表明Exendin-4通过多个靶点对NOD发挥治疗作用